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【干貨分享】關(guān)于大腸桿菌重組蛋白表達系統(tǒng)解答

大腸桿菌（E.coli）重組蛋白表達技術(shù)經(jīng)過多年的發(fā)展，相對于其他表達體系，算是非常成熟的一個體系。大腸桿菌蛋白表達系統(tǒng)主要有以下特點：遺傳背景清楚；易于培養(yǎng)和控制；轉(zhuǎn)化操作簡單；表達水平高；成本低；周期短。本篇將對大腸桿菌重組蛋白表達系統(tǒng)的常見技術(shù)問題進行一一解答。1：大腸桿菌表達體系的優(yōu)點是什么？（1）菌體繁殖速度快：20分鐘倍增一次，這意味著按照1/100的比例接種（MOI），只需要幾個小時培養(yǎng)基細菌即可到達穩(wěn)定期；（2）容易實現(xiàn)高密度培養(yǎng)：理論培養(yǎng)密度是1×1013c...

【技術(shù)服務(wù)】常規(guī)小鼠源多克隆抗體定制服務(wù)

多克隆抗體血清制備抗體的產(chǎn)生，是圍繞B淋巴細胞的激活與分化為漿細胞進行的。在shou次免疫過程中，抗原首先經(jīng)多種免疫相關(guān)淋巴或巨噬細胞吞噬充分暴露抗原，并將抗原呈遞給靜止B淋巴細胞，以使其活化，活化后的B淋巴細胞轉(zhuǎn)化為漿細胞，也就是抗體的產(chǎn)生者。由于抗原的表面存在多種抗原識別決定簇，因此在經(jīng)過免疫相關(guān)細胞加工后，呈遞給B淋巴細胞的抗原決定簇也是多種多樣的,理論上,-個B淋巴細胞只接受-種抗原決定簇,產(chǎn)生-種對應與之結(jié)合的抗體,多個B淋巴細胞就會產(chǎn)生多種識別抗原不同抗原決定簇(...

安諾倫代理品牌Lumiprobe——高品質(zhì)活性熒光染料供應商

LumiprobeCorporation品牌logoLumiprobeCorporation是美國一家高品質(zhì)生物技術(shù)公司，專業(yè)提供分子生物學研究用的活性熒光染料。從2006年起，公司開始生產(chǎn)并銷售生命科學研究和診斷學應用的優(yōu)質(zhì)化學藥品。主要產(chǎn)品有：活性染料（ReactiveDye）和SYBRGreenI染料，定制合成熒光雙標記引物。產(chǎn)品主要應用：點擊化學（CLickChemistry）、蛋白質(zhì)組學研究中的雙向熒光差異凝膠電泳（2DDIGE）和實時熒光定量PCR（ReaLtim...

重組蛋白質(zhì)的表達、純化、復性和定量

按操作手冊進行，具體步驟如下。一、重組蛋白質(zhì)的誘導表達1.挑取轉(zhuǎn)化有質(zhì)粒的單菌落，接種于3ml選擇性LB液體培養(yǎng)基中，37oC，250rpm/min振搖培養(yǎng)過夜。2.次日將培養(yǎng)過夜的菌液500μl再接種于10ml（1:::20）選擇性LB液體培養(yǎng)基中，37oC，250rpm/min振搖培養(yǎng)至光密度（OD600=0.6）時，取1ml樣本作為誘導前標本，10000g離心1min收集菌體沉淀，－20oC凍存?zhèn)溆谩?.加入1mol/LIPTG于菌液中，使IPTG終濃度為1mM，37o...

拿來吧你，拯救你的重組蛋白

重組蛋白是應用了重組DNA或重組RNA技術(shù)而獲得的蛋白質(zhì)。用于生產(chǎn)重組蛋白的宿主細胞主要是細菌（大腸桿菌）、哺乳動物細胞、昆蟲細胞和酵母。重組蛋白已被廣泛應用于蛋白結(jié)構(gòu)研究、免疫檢測試劑、重組蛋白藥物、診斷試劑開發(fā)、抗體藥物靶點、CAR-T細胞治療靶點、Fc受體、流感病毒蛋白和細胞因子等大多數(shù)熱門研究領(lǐng)域。那大家在進行重組蛋白表達時不知道會不會糾結(jié)這些問題：該選擇什么表達系統(tǒng)？蛋白產(chǎn)量怎么才能有所提高？接下來帶你們了解一些常見的外源基因表達系統(tǒng)（包括原核、真核表達系統(tǒng)）以及一...

新手小白細胞轉(zhuǎn)染的注意事項

轉(zhuǎn)染可謂是做生物學實驗的大家經(jīng)常會考慮的一項實驗技術(shù)，大致原理也都是明白的。但是在實驗時經(jīng)常會遇到轉(zhuǎn)染效率太低，以至于無法進行后續(xù)的實驗。到底轉(zhuǎn)染是什么呢？為什么轉(zhuǎn)染效率不高呢？其實轉(zhuǎn)染，就是在真核細胞里導入具有生物功能的核酸，并在細胞中維持其生物功能。轉(zhuǎn)染方法的選擇我們熟知且常用的轉(zhuǎn)染方法主要有物理介導，化學介導，生物介導。物理介導方法：電穿孔法、顯微注射和基因槍；化學介導方法：如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導的技術(shù)；生物介導方法：有較為原始的原...

安諾倫銷售代理Leading Biology產(chǎn)品試劑*......

BIRC8/ILP2Antibody(N-Terminus)|LBP65960|LeadingBiology品牌LeadingBiology貨號LBP65960產(chǎn)地美國價格面詢保存條件:存儲在2-8°C2周，長期存儲20°C,防止凍融循環(huán)。英文名:BIRC81ILP2Antibody(N-Terminus)供應商:安諾倫(北京)生物科技有限公司規(guī)格:50ug商品分類:多克隆抗體產(chǎn)品概述:ProtectsagainstapoptosismediatedbyBAX.靶點/蛋白:s...

技術(shù)服務(wù)|大鼠源單克隆抗體定制服務(wù)

單克隆抗體/雜交瘤細胞定制服務(wù)雜交瘤技術(shù)的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經(jīng)抗原免疫的免疫動物脾細胞(如小鼠B淋巴細胞)和具有永生功能的腫瘤細胞(如小鼠骨髓瘤細胞)。被特異性抗原免疫的免疫動物脾細胞(B淋巴細胞)的主要特征是它的抗體能夠分泌產(chǎn)生結(jié)合抗原特定位置(表位)的抗體,但其自身不能在體外連續(xù)培養(yǎng)，具有永生功能的腫瘤細胞(骨髓瘤細胞)則可在培養(yǎng)條件下無限分裂、增殖，即具有所謂永生性。在選擇培養(yǎng)基的作用下，只賄由一個B淋巴細胞與一個骨髓瘤...